kj 1303 다운로드

PCa 종양 발생에서 miR-1303의 분자 기전을 조사하기 위해, TargetScan은 miR-1303의 가양성 표적 유전자를 확인하기 위해 이용되었다. 결과는 DKK3의 3′-UTR이 miR-1303에 대한 예측 된 대상 사이트를 포함한 것으로 나타났습니다. 이러한 관계를 확인하기 위해, 루시퍼라제 리포터, RT-qPCR 및 서부 블로팅 아세(그림 3)를 수행하였다. DKK3-WT 또는 DKK3-MUT는 miR-1303 모방 또는 NC 모방을 DU145 세포로 공동 형질감염시켰습니다; miR-1303모방은 DKK3-WT의 루시퍼라아제 활성을 크게 감소시켰지만, DKK3-MUT의 루시퍼라아제 활성은 명백한 변조가 없었다(도 3A). 따라서, 이러한 결과는 DKK3가 miR-1303의 직접적인 표적임을 입증했다. 더욱이, RT-qPCR 및 웨스턴 블로팅은 DKK3의 mRNA 및 단백질 발현이 miR-1303 모방에 의해 크게 감소하고 miR-1303 억제제(all P<0.001;; 도 3B 및 C). 이러한 데이터는 miR-1303이 DKK3 발현을 부정적으로 조절한다는 것을 보여주었다. 본 연구에서 나온 결과는 miR-1303 발현이 PCa 조직 및 세포주에서 증가되었다는 것을 나타냈다. miR-1303의 수준은 더 높은 글리슨 점수 및 더 진보된 종양 단계와 밀접하게 연관되었습니다. PCa를 가진 환자는 miR-1303의 상부를 또한 감소된 전반적인 생존율을 표시했습니다. miR-1303의 높은 발현은 PCa 세포의 증식, 이동 및 침입을 촉진시켰다. 또한, miR-1303의 억제는 마우스에서 PCa 이식종양의 성장을 효과적으로 억제하였다. 이러한 결과는 miR-1303이 PCa의 진행 및 발달에서 종양유전자로서 작용할 수 있음을 나타냈다.

따라서, miR-1303은 PCa 치료를 위한 잠재적바이오마커일 수 있다. Wnt/β-카테닌 통로는 세포 성장 및 분화와 같은 세포 생물학적 과정에 매우 중요합니다(32). Wnt/β-카테닌 경로를 활성화한 후, β-카테닌 수준은 세포질에서 증가하고, 이어서 핵으로전좌(33)를 전좌한다. β-카테닌은 주로 사이클린 D1 및 c-Myc(34)를 함유하는 표적 유전자의 전사를 활성화한다. Wnt/β-카테닌 통로의 비정상적인 활성화는 발암에 기여하는 많은 유형의 암에서 자주 관찰됩니다 (35). Wang et al al(36)은 DKK3가 Wnt/β-카테닌 경로를 조절하여 시스플라틴 내성 폐 선암세포의 세포사멸을 유도할 수 있음을 입증하였다. 본 연구는 PCa 세포에서 miR-1303의 제기 발현이 DKK3 발현을 억제하고 Wnt/β-카테닌 경로를 활성화시켜 세포 증식, 이동 및 침윤을 촉진할 수 있음을 나타냈다. 데이터는 평균 ± 표준 편차로 제시되고 SPSS 소프트웨어(버전 13.0)에 의해 분석되었다. (주)SPSS 모든 실험은 적어도 3회 이상 독립적으로 반복되었다. 학생의 t-시험은 두 그룹 간의 차이를 평가하는 데 사용되었습니다.

단방향 ANOVA다음에 Tukey의 테스트가 여러 번 비교를 위해 수행되었습니다. σ2 시험은 PCa를 가진 환자에서 miR-1303 발현 및 임상 특징 사이의 연관성을 결정하기 위해 적용되었다. miR-1303 수준과 환자 전체 생존 시간 사이의 관계는 Kaplan-Meier 방법 및 로그 랭크 테스트에 의해 평가되었다. P<0.05는 통계적으로 유의한 차이를 나타내는 것으로 간주되었다. DKK3가 Wnt/β-카테닌 신호 경로(26)의 억제제로서 기능할 수 있다고 보고되었기 때문에, Wnt/β-카테닌 경로에 대한 miR-1303 억제제의 효과는 서쪽 블로팅에 의해 조사되었다(도 5A). NC 억제제와 비교하여, β-카테닌 및 이의 다운스트림 분자 c-Myc 및 사이클린 D1의 발현은 miR-1303 억제제(P<0.001)로 형질전환 후 DU145 세포에서 감소하였다.